Fully Human Mab Platform :
Anticorps monoclonaux 100% humains

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Fully Human Mab Platform

Phases
préliminaires

La stratégie proposée par BIOTEM pour générer des anticorps monoclonaux 100% humains consiste à immortaliser des cellules exprimant naturellement des anticorps humains spécifiques d’une cible d’intérêt (un virus, une bactérie...)

L’identification de donneurs potentiels ayant généré une réponse immunitaire adéquate constitue donc un des objectifs prioritaires de la phase préliminaire.

Sélection
Enrichissement

Sélection / Enrichissement
des cellules cibles
Sélection : Les PBMCs (Peripherical Blood Mononuclear Cells), contenant notamment les lymphocytes B mémoires (cellules cibles), sont extraits du sang total par gradient de densité (Figure 1).

Enrichissement : BIOTEM a développé différentes stratégies d’enrichissement (Figure 2) permettant d’optimiser les étapes suivantes du projet (activation et immortalisation) :
  • FACS (Fluorescence-activated cell sorting)
  • Séparation magnétique

Activation
Immortalisation

Figure 3. Activation et immortalisation des lymphocytes B

Activation
cellulaire

L’activation des cellules sélectionnées permet d’optimiser considérablement les rendements d’immortalisation (proches de 100%).

Cette étape est réalisée in vitro selon des procédés et un savoir-faire développés par BIOTEM (Figure 3a).

Immortalisation
EBV

L’étape d’immortalisation est réalisée par mise en contact des cellules activées avec des particules virales EBV (Figure 3b).

Les cellules se différentient alors en LCLs (Lymphoblastoïd Cell Line), caractérisées par une capacité de prolifération et de sécrétion d’anticorps.

Criblages
Clonages

L’étape de criblage permet de sélectionner les LCLs sécrétant des anticorps spécifiques de la cible d’intérêt. Les cellules sont ensuite stabilisées par clonage grâce au Cyclop Screening System. A ce stade, les lymphocytes immortalisés sécrètent des anticorps monoclonaux.
Au cours de ces différentes étapes, BIOTEM met en place une gestion opérationnelle des projets :

Le Cyclop Screening System est une plateforme technologique unique couplée à un LIMS (Laboratory Information Management System).

Cette technologie propriétaire permet d’assurer une gestion optimale des différentes phases de génération d’anticorps :

  • Manipulation des microplaques et transfert des fluides
  • Robustesse des criblages
  • Traçabilité inégalée des clones

Production
Caractérisation

Production
Purification
Modification

Production en HyperFlask, CELLine, Bioréacteurs, Ascite, Chromatographie d’affinité, Exclusion, Précipitation, Interactions hydrophobes, Papaïne en savoir plus...

Services
Additionnels

Séquençage, Création de banques validées, Epitope mapping, Clonage, Vecteur d’expression, CNCM, Stabilité, Couplage : en savoir plus...