Anticorps Monoclonaux
Souris & Rats
BIOTEM dispose d’une expertise et d’un savoir-faire internationalement reconnus en matière de création d’anticorps monoclonaux à façon. Les stratégies déployées s’articulent principalement autour de 2 phases cruciales dont dépend la réussite des projets :
La société maîtrise un très large panel de techniques/protocoles permettant de générer efficacement les hybridomes/anticorps possédant les propriétés recherchées.
Pour chaque projet, BIOTEM met en place un ou plusieurs système(s) d’identification très sélectif(s) (faux positifs et faux négatifs réduits) des hybridomes/anticorps d’intérêt.
HybridoMap
Phases
préliminaires
Pour chaque projet, nous définissons avec nos clients un cahier des charges extrêmement précis en fonction :
Détermination du
cahier des charges
Engagement de
résultats
Définition de la stratégie la
plus pertinente
Typologie de cible :
- Modifications post-traductionnelles (phosphorylation, nitration, glycosylation)
- Protéines sécrétées & intracellulaires
- Protéines membranaires (GPCR, canaux ioniques, etc.)
- Peptides
- Acides nucléiques
- Antigènes cellulaires (cellules, virus, bactéries)
- Composés chimiques (haptènes)
Applications finales :
- ELISA, WB, IP, IF, IHC, FACS
- Tests fonctionnels, etc
Matériel initial &
Contraintes projets
- Matériel disponible (quantité / pureté)
- Immunogénicité
- Toxicité
- Spécification/réactivité croisée
- Délai
Design
de peptides
L’immunisation peptidique constitue une stratégie pertinente pour la génération d’anticorps dirigés contre des épitopes présélectionnés. Cette approche permet également de s’affranchir des étapes de préparation des immunogènes protéiques.
BIOTEM possède l’expérience et le savoir-faire permettant d'intégrer de façon optimale tous les paramètres et contraintes du design de peptides immunogènes :
- Application (WB, ELISA, IP, IHC, etc.)
- Spécificité (réactivité croisée désirable/ indésirable)
- Prédiction et analyse d’épitopes (différents algorithmes)
- Stratégie de couplage
Protéines
membranaires :
BIOTEM offre des solutions spécifiques pour la production d’immunogènes membranaires (GPCR, canaux ioniques...).
A partir d’une séquence théorique et/ou d’un cDNA (plasmide), les protéines cibles peuvent être obtenues purifiées sous forme de protéoliposomes et/ou protéines solubilisées selon différents procédés exclusifs.
- Protéines conformationnelles et fonctionnelles (contrôles qualité Patch Clamp, test fonctionnel...)
- Génération d’anticorps dirigés contre des épitopes natifs
- Compatibilité tout protocole (R.A.D®, soustractif...)
Immunisation
fusion
BIOTEM propose une offre de services à haute valeur ajoutée pour la génération à façon d’anticorps monoclonaux. Différents protocoles/techniques peuvent être mis en œuvre de manière combinée ou séparée.
Protocole
R.A.D®
Exclusivité BIOTEM
Ce procédé exclusif permet le développement rapide d’hybridomes en moins de 1 mois (phases d’immunisation/fusion et criblage compris).
Le protocole R.A.D® permet ainsi de raccourcir de 1 à 3 mois la durée de réalisation des projets complets (incluant les étapes de clonages, production/purification des anticorps).
Immunisation
Soustractive
BIOTEM maîtrise différentes techniques d’immunisation soustractive.
Ces techniques sont particulièrement utiles pour générer des anticorps dirigés contre des cibles très homologues et/ou des épitopes peu immunogéniques.
Immunisation
génétique
La technique d’immunisation génétique consiste à injecter un plasmide d’expression in vivo codant pour une protéine cible laquelle va ensuite agir in situ comme immunogène.
Bien maîtrisée, cette technique permet d’obtenir rapidement des anticorps spécifiques à partir d’une simple séquence théorique.
BIOTEM propose son expertise et savoir-faire pour l’évaluation, la mise en place et la réalisation de tout projet d’immunisation génétique.
Immunisation
Restimulation in vitro
L’injection de substances immunogènes ne constitue pas toujours une approche pertinente pour le développement d’anticorps monoclonaux.
En effet, certaines molécules sont très toxiques après injection et/ou pas immunogénique.
BIOTEM dispose néanmoins d’un panel de stratégies d’immunisation in vitro permettant de contourner certaines des limitations concernant les immunisations in vivo.
Criblages
Clonages
Le développement d’anticorps monoclonaux comprend différentes étapes clés impliquant la détection des hybridomes d’intérêt :
Exclusivité BIOTEM
Le Cyclop Screening System est une plateforme technologique unique couplée à un LIMS (Laboratory Information Management System).
Cette technologie propriétaire permet d’assurer une gestion optimale des différentes phases de génération d’anticorps :
Manipulation des microplaques et transfert des fluides
Robustesse des criblages
Traçabilité inégalée des clones
- Criblage primaire
des hybridomes provenant de la fusion
(stade polyclonal) - Confirmation
des clones positifs
(stade polyclonal) - Clonage
des hybridomes
(obtention de lignées monoclonales stables)
Au cours de ces différentes étapes, BIOTEM met en place une gestion opérationnelle optimisée des projets :
Anticorps
Productions, Purifications
Modifications
Production en HyperFlask, CELLine, Bioréacteurs, Ascite, Chromatographie échangeuse d’ions , Affinité, Exclusion, Précipitation, Interactions hydrophobes, Papaïne, Pepsine, Réduction chimique, en savoir plus...
