BIOTEM dispose d’une expertise et d’un savoir-faire internationalement reconnus en matière de création d’anticorps monoclonaux à façon. Les stratégies déployées s’articulent principalement autour de 2 phases cruciales dont dépend la réussite des projets :
- Immunisation / Fusion
La société maîtrise un très large panel de techniques/protocoles permettant de générer efficacement les hybridomes/anticorps possédant les propriétés recherchées.
- Criblage
Pour chaque projet, BIOTEM met en place un ou plusieurs système(s) d’identification très sélectif(s) (faux positifs et faux négatifs réduits) des hybridomes/anticorps d’intérêt.
Pour chaque projet, nous définissons avec nos clients un cahier des charges extrêmement précis en fonction :
| Design de Peptides :
L’immunisation peptidique constitue une stratégie pertinente pour la génération d’anticorps dirigés contre des épitopes présélectionnés. Cette approche permet également de s’affranchir des étapes de préparation des immunogènes protéiques.
BIOTEM dispose de l’expérience et du savoir-faire nécessaire à l’intégration de tous les paramètres clés pour une conception réussie de vos peptides immunogènes :
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- Application (WB, ELISA, IP, IHC, etc.)
- Spécificité (réactivité croisée désirable/indésirable)
- Prédiction et analyse d’épitopes (différents algorithmes)
- Stratégie de couplage
- Etc.
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Protéines membranaires :
BIOTEM dispose de solutions spécifiques pour la production d’immunogènes membranaires (GPCR, canaux ioniques, etc.).
A partir d’une séquence théorique et/ou d’un cDNA (plasmide), les protéines cibles peuvent être obtenues purifiées sous forme de protéoliposomes et/ou protéines solubilisées selon différents procédés exclusifs.
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- Protéines conformationnelles et fonctionnelles (contrôles qualité Patch Clamp, test fonctionnel, etc.)
- Génération d’anticorps dirigés contre des épitopes natifs.
- Compatibilité tout protocole (RAD, soustractif, etc.)
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BIOTEM dispose d’une offre de service ultra performant pour la génération à façon d’anticorps monoclonaux. Différentes protocoles/techniques peuvent être mise en œuvre de façon combiné ou séparément.
Protocole RAD (Rapid Antibody Development)
Ce procédé exclusif permet le développement rapide d’hybridomes en moins de 1 mois (phases d’immunisation/fusion et criblage compris).
Le protocole RAD permet ainsi de raccourcir de 1 à 3 mois la durée de réalisation des projets complets (incluant les étapes de clonages, production/purification des anticorps).
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- Rapidité (<1 mois)
- Protocole « haut rendement »
- Qualité optimale des anticorps (diversité, affinité, spécificité...)
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Immunisation génétique :
La technique d’immunisation génétique consiste à injecter un plasmide d’expression in vivo codant pour une protéine cible laquelle va ensuite agir in situ comme immunogène.
Bien maîtrisée, cette technique permet d’obtenir rapidement des anticorps spécifiques à partir d’une simple séquence théorique.
BIOTEM propose son expertise et savoir-faire pour l’évaluation, la mise en place et la réalisation de tout projet d’immunisation génétique.
Immunisation Soustractive :
BIOTEM maîtrise différentes techniques d’immunisation soustractive. Ces techniques sont particulièrement utiles pour générer des anticorps dirigés contre des cibles très homologues et/ou des épitopes peu immunogéniques.
Immunisation / Restimulation In vitro :
L’injection de substances immunogènes ne constitue pas toujours une approche pertinente pour le développement d’anticorps monoclonaux. En effet, certaines molécules sont très toxiques après injection et/ou pas immunogénique. BIOTEM dispose néanmoins d’un panel de stratégies d’immunisation in vitro permettant de contourner certaines des limitations concernant les immunisations in vivo.
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Le développement d’anticorps monoclonaux comprend différentes étapes clés impliquant la détection des hybridomes d’intérêt :
- Criblage primaire des hybridomes provenant de la fusion (stade polyclonal)
- Confirmation des clones positifs (stade polyclonal)
- Clonage des hybridomes (obtention de lignées monoclonales stables)
Au cours de ces différentes étapes, BIOTEM met en place une gestion opérationnelle optimisée des projets :
- Sélectivité : Criblage à façon haute performance (faux positifs, faux négatifs réduits)
- Robustesse : Plateforme semi automatisée assurant traçabilité et fiabilité des criblages
- Conformité : Validations intermédiaire et finale des clones par le client
- Sécurité : Production de banques validées aux étapes critiques
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