Anticorps monoclonaux recombinants

1. Spécifications projet

Pour chaque cas, notre équipe explore avec le client les enjeux du projet et, ensemble, ils définissent le cahier des charges.

• La cible d’intérêt : protéine membranaire, peptide, petite molécule, modifications post-traductionnelles, etc.
• Les applications thérapeutiques
• Les particularités : Matériel disponible, spécificité, délais, etc.

En prenant en compte ces multiples paramètres BIOTEM proposera des stratégies sur-mesure afin de répondre aux problématiques du client et garantir le succès du projet.

2. Immunisation animaux

En fonction de la demande et des spécifications du client, BIOTEM dispose d’un large panel de stratégies d’immunisations qui ont fait leurs preuves pour l’obtention d’anticorps de hautes affinités et spécificités. Des méthodologies adaptées sont développées afin de s’assurer que la réponse immunitaire appropriée soit atteinte. A l’issue de cette phase BIOTEM pourra proposer un contrat avec engagement de résultats. Le client aura également la possibilité de tester les sérums dans son propre système.

• Immunisation protéique : De la production de la protéine recombinante (transfection transitoire en CHO) à sa préparation pour les immunisations, BIOTEM peut vous accompagner sur cette étape cruciale du projet.
• Immunisation peptidique : BIOTEM possède l’expérience et le savoir-faire permettant d'intégrer de façon optimale tous les paramètres et contraintes du design de peptides immunogènes. Stratégie pertinente pour la génération d’anticorps dirigés contre des épitopes présélectionnés, cette approche permet également de s’affranchir des étapes de préparation des immunogènes protéiques.
• Autres : Immunisation petites molécules
• Liste non-exhaustive

3. Librairie & Phage Display

Contrairement aux librairies naïves ou synthétiques, BIOTEM propose la construction de librairies immunes (immune libraries), au format V_HH / nanobody, focalisées sur la cible d’intérêt. Combinée à un criblage haut débit (ou bio-panning) par phage display cette stratégie permet d’optimiser les chances de succès pour l’obtention d’anticorps de haute affinité et de haute spécificité.

• Sélection d’un grand nombre de candidats
• Criblages optimisés selon différents formats (direct, compétitif, soustractif, etc.) avec différentes conditions de stringences
• Accès immédiat aux séquences (clones uniques – analyse de la redondance)
• Production, Purification et Caractérisation des candidats (réactivité, affinité, etc.)

A l’issue de cette phase le client aura la possibilité de tester les candidats dans son application et sélectionner le ou les meilleurs pour la phase de reformatage en format Ig complète (full Ig) ou autres formats.

4. Reformatage & Ingénierie

Cette étape permet le passage du format VHH à des formats plus "exotiques" (VHH-Fc, VHH bivalent ou tetravalent, etc.) grâce à une plateforme entièrement intégrée pour la production d’anticorps recombinants en cellules mammifères (CHO). En savoir +

• Différents isotypes et espèces possibles
• Optimisation de séquences
• Ingénierie des anticorps (Mutations, Protéine fusion-Fc, anticorps bispécifique, Fab, etc)
• Génération de variants (chimérisation, humanisation, etc)
• Production et purification d’un lot pilote

Envoi du lot pilote pour tests chez le client et choix du ou des candidats finaux pour une production à large échelle.

5. Production & purification

BIOTEM met à disposition sa plateforme de production d’anticorps recombinants par transfection transitoire en cellules CHO pour des productions large échelle. En savoir +

• Production du milligramme à plusieurs grammes.
• Compatible « Low endotoxin » (< 10 EU/mg ; voire < 1 EU/mg)
• Système Serum free
• Contrôles qualité (concentration, pureté, affinités, agrégation, stabilité, etc.)