PHAGE DISPLAY : Anticorps Monoclonaux de Lamas et Autres Espèces
Technologie de plus en plus répandue, le Phage Display permet la génération d’anticorps en format recombinant issus d’une banque immune construite à partir des animaux immunisés (lamas, dromadaires ou autres camélidés, etc.). Cette approche offre la possibilité de tester un grand nombre de clones grâce à un criblage haut débit et permet un accès aux séquences dès les premières phases. Grâce à leur format de petite taille (VHH ou nanobody), le développement d’anticorps de lamas sont des outils de choix pour la thérapeutique et la passage de barrières physiologiques.
Au cours du programme, BIOTEM met en place une gestion opérationnelle optimisée des projets avec des contrôles qualité stricts et un accompagnement personnalisé tout au long du programme.
BIOTEM ne revendique aucune propriété intellectuelle ou autre droit sur les anticorps
Le phage display est une technologie qui s’impose pour l’obtention d’outils en thérapeutiques humaine et vétérinaire.
- Construction d’une banque immune à partir d’animaux ou donneurs immunisés
- Criblage haut débit par Phage display
- Séquençage des clones
- Production d’anticorps recombinants (plusieurs formats possibles)
Spécifications
projet
1. Spécifications projet
Pour chaque cas, notre équipe explore avec le client les enjeux du projet et, ensemble, ils définissent le cahier des charges.
- La cible d’intérêt : protéine membranaire, peptide, petite molécule, modifications post-traductionnelles, etc.
- Les applications thérapeutiques
- Les particularités : Matériel disponible, spécificité, délais, etc.
En prenant en compte ces multiples paramètres BIOTEM proposera des stratégies sur-mesure afin de répondre aux problématiques du client et garantir le succès du projet.
Immunisation
Animaux
2. Immunisation animaux
En fonction de la demande et des spécifications du client, BIOTEM dispose d’un large panel de stratégies d’immunisations qui ont fait leurs preuves pour l’obtention d’anticorps de hautes affinités et spécificités. Des méthodologies adaptées sont développées afin de s’assurer que la réponse immunitaire appropriée soit atteinte. A l’issue de cette phase BIOTEM pourra proposer un contrat avec engagement de résultats. Le client aura également la possibilité de tester les sérums dans son propre système.
- Immunisation protéique : De la production de la protéine recombinante (transfection transitoire en CHO) à sa préparation pour les immunisations, BIOTEM peut vous accompagner sur cette étape cruciale du projet.
- Immunisation peptidique : BIOTEM possède l’expérience et le savoir-faire permettant d'intégrer de façon optimale tous les paramètres et contraintes du design de peptides immunogènes. Stratégie pertinente pour la génération d’anticorps dirigés contre des épitopes présélectionnés, cette approche permet également de s’affranchir des étapes de préparation des immunogènes protéiques.
- Autres : Immunisation petites molécules
- Liste non-exhaustive
Librairie &
Phage Display
3. Librairie & Phage Display
Contrairement aux librairies naïves ou synthétiques, BIOTEM propose la construction de librairies immunes (immune libraries), au format VHH / nanobody, focalisées sur la cible d’intérêt. Combinée à un criblage haut débit (ou bio-panning) par phage display cette stratégie permet d’optimiser les chances de succès pour l’obtention d’anticorps de haute affinité et de haute spécificité.
- Sélection d’un grand nombre de candidats
- Criblages optimisés selon différents formats (direct, compétitif, soustractif, etc.) avec différentes conditions de stringences
- Accès immédiat aux séquences (clones uniques – analyse de la redondance)
- Production, Purification et Caractérisation des candidats (réactivité, affinité, etc.)
A l’issue de cette phase le client aura la possibilité de tester les candidats dans son application et sélectionner le ou les meilleurs pour la phase de reformatage en format Ig complète (full Ig) ou autres formats.
Reformatage &
Ingénierie
4. Reformatage & Ingénierie
Cette étape permet le passage du format VHH à des formats plus "exotiques" (VHH-Fc, VHH bivalent ou tetravalent, etc.) grâce à une plateforme entièrement intégrée pour la production d’anticorps recombinants en cellules mammifères (CHO). En savoir +
- Différents isotypes et espèces possibles
- Optimisation de séquences
- Ingénierie des anticorps (Mutations, Protéine fusion-Fc, anticorps bispécifique, Fab, etc)
- Génération de variants (chimérisation, humanisation, etc)
- Production et purification d’un lot pilote
Envoi du lot pilote pour tests chez le client et choix du ou des candidats finaux pour une production à large échelle.
Production &
Purification
5. Production & purification
BIOTEM met à disposition sa plateforme de production d’anticorps recombinants par transfection transitoire en cellules CHO pour des productions large échelle. En savoir +
- Production du milligramme à plusieurs grammes.
- Compatible « Low endotoxin » (< 10 EU/mg ; voire < 1 EU/mg)
- Système Serum free
- Contrôles qualité (concentration, pureté, affinités, agrégation, stabilité, etc.)
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