Quinthetic LibraryTM : Anticorps à partir de banques synthétiques
Le nombre total d’anticorps disponibles pour un individu est connu sous le nom de répertoire d’anticorps, et chez l’Homme, il est d’au moins 1011.
(Source : Immunobiology: The Immune System in Health and Disease. 5th edition).
En choisissant d’introduire la variabilité des anticorps à la fois dans les CDRs (différentes longueurs et ratios d’acides aminés à des positions optimisées) et dans les résidus Vernier (un sous-ensemble d’acides aminés spécifiques), nos concepteurs T. Pelat et A. Guellouz permettent de potentialiser la diversité des paratopes à la fois dans les séquences CDR et dans leurs orientations. Cette stratégie basée sur de la variabilité « quintessenciée » (par opposition aux variabilités purement aléatoires) génère un nouveau type de librairies synthétiques appelées Quinthetic LibraryTM.
Where diversity really matters…
VHH Quinthetic LibraryTM : Banque de VHH humanisés
scFv Quinthetic LibraryTM : Banque de scFv 100% humains
Cette offre « clé en main » vient compléter les services de génération de banques immunes focalisées sur des immunogènes d’intérêts. Elle peut être une alternative aux immunisations dans le cas de cibles toxiques, peu immunogéniques, très conservées ou correspondant parfois à des fonctions vitales.
Cette solution permet également l’obtention d’anticorps très rapidement et à moindre coût, en économisant les efforts et les coûts de production / purification de grandes quantités d’immunogènes.
Si nécessaire, les candidats identifiés lors des premières étapes de criblage pourront faire l’objet d’une optimisation de séquence/ maturation d’affinité afin d’en améliorer les caractéristiques. BIOTEM pourra également proposer un large panel de services associés dans le but de caractériser et produire ces anticorps en conditions GMP-like grâce à sa plateforme de production d’anticorps recombinants.
Banques générées avec le support de La Région Auvergne-Rhône-Alpes.
Les avantages généraux des librairies synthétiques pour l’obtention d’anticorps :
- Rapide (6 à 8 semaines)
- Technologie animal-free
- Nécessite peu d’antigène (< 150 µg)
- Adaptées aux cibles non-immunogéniques
- Adaptées aux cibles toxiques.
- Généralités
VHH
1. Généralités sur les VHH Un VHH (single-domain antibody ou nanobody) est un fragment d'anticorps naturellement produit chez les camélidés (lamas, dromadaire, etc.). Grâce à leur petite taille (15 kDa), les VHH peuvent passer certaines barrières physiologiques et pourraient être plus efficaces en santé humaine et animale. De plus, contrairement aux anticorps IgG conventionnels, les VHH sont capables de se lier à des régions moins exposées et à des épitopes cryptiques avec une très grande spécificité et une solubilité exceptionnelle, offrant ainsi de multiples avantages en tant qu’outils thérapeutique.
Avantages
Banque VHH
2. Les avantages de la banque BIOTEM
BIOTEM propose VHH Quinthetic LibraryTM, une banque synthétique de VHH humanisés. Cette banque présente de nombreux avantages par rapport aux banques déjà disponibles sur le marché. Elle a déjà été challengée sur une multitude d'antigènes (protéine soluble, membranaire, peptide, cellule, etc.) et montre un taux de succès proche de 90% !- Design optimisé pour avoir une très haute stabilité (pH, température, protéase), une diversité focalisée (high spot et résidus d'ancrage), une meilleure manufacturabilité (PTM)
- Adapté à tous types d'applications : de la recherche (cristallographie), au diagnostic (immunoessais) et aux études pré-cliniques en thérapeutique grâce à leur pré-humanisation (environ 85%)
- Reformatage facilité : avec sa chaîne unique, de nombreuses possibilités de production selon différents formats recombinants (bivalent, tétravalent, etc.)
- Taille > 3 x 109 : permettant d'optimiser les chances de succès d'obtention d'anticorps après criblage
Criblage
Phage Display
3. Criblage Phage Display
En fonction de la cible d'intérêt et des critères du client, les équipes proposeront un criblage haut débit adapté (ou bio-panning) par phage display afin d'identifier les meilleurs candidats avec un accès direct aux séquences.
- Sélection des VHH humanisés en quelques semaines
- Criblages standards ou optimisés selon les spécifications du client
- Accès immédiat aux séquences (clones uniques – analyse de la redondance)
- Production, Purification et Caractérisation des candidats (réactivité, affinité, etc.)
A l’issue de cette phase le client aura la possibilité de tester les VHH dans son application et de sélectionner le ou les meilleurs candidats pour une optimisation/ production large échelle.
Optimisation &
Production
4. Optimisation & Production large échelle
En fonction des résultats obtenus après criblage, le client aura la possibilité de sélectionner le meilleur candidat pour réaliser une optimisation de séquence/ maturation d'affinité (si nécessaire) et lancer une production large échelle.
BIOTEM dispose également d'un panel de services d'ingénierie d'anticorps permettant entre autres de reformater les VHH en différents formats (VHH-Fc, bivalent, tétravalent, etc.) grâce sa plateforme de production d’anticorps recombinants par transfection transitoire en cellules CHO. En savoir +- Production du milligramme à plusieurs grammes
- Compatible « Low endotoxin » (< 10 EU/mg ; voire < 1 EU/mg)
- Système Serum free
- Grade GMP-like
- Contrôles qualité (concentration, pureté, affinités, agrégation, stabilité, etc.).
- Généralités
scFv
1. Généralités sur les scFv Un scFv (single-chain variable fragment) n'est pas réellement un fragment d'anticorps mais plutôt une protéine de fusion des régions variables VH et VL associées par un linker. Grâce à sa taille d'environ 25 kDa mais également à sa facilité d'expression et de reformatage, le scFv peut être utilisé dans différentes applications comme en thérapeutique avec les anticorps intracellulaires (intrabodies) ou les cellules CAR-T exprimant à leur surface un scFv. Le scFv peut également être utilisé comme outils aidant au diagnostic, notamment avec la possibilité de l'associer avec différents types de molécules ou traceurs (molécule fluorescente, enzyme, etc.).
Avantages
Banque scFv
2. Les avantages de la banque BIOTEM BIOTEM propose scFv Quinthetic LibraryTM, une banque synthétique de scFv humains. Cette banque présente de nombreux avantages par rapport aux banques déjà disponibles sur le marché.- Design optimisé avec la sélection d'un scaffold hautement stable et un attention particulièrement sur la diversité (mutagenèse)
- Adapté à tous types d'applications : de la recherche , au diagnostic (immunoessais) et aux études pré-cliniques en thérapeutique grâce au format 100% humain.
- Reformatage facilité : de nombreuses possibilités de production selon différents formats recombinants (scFv-Fc, scFv dimérique, IgG, etc..)
- Taille ~1010 : permettant d'optimiser les chances de succès d'obtention d'anticorps après criblage
Criblage
Phage Display
3. Criblage Phage Display En fonction de la cible d'intérêt et des critères du client, les équipes proposeront un criblage haut débit adapté (ou bio-panning) par phage display afin d'identifier les meilleurs candidats avec un accès direct aux séquences.- Sélection des scFv humains en quelques semaines
- Criblages standards ou optimisés selon les spécifications du client
- Accès immédiat aux séquences (clones uniques – analyse de la redondance)
- Production, Purification et Caractérisation des candidats (réactivité, affinité, etc.)
Optimisation &
Production
4. Optimisation & Production large échelle En fonction des résultats obtenus après criblage, le client aura la possibilité de sélectionner le meilleur candidat pour réaliser une optimisation de séquence/ maturation d'affinité (si nécessaire) et lancer une production large échelle. BIOTEM dispose également d'un panel de services d'ingénierie d'anticorps permettant entre autres de reformater les scFv en différents formats (scFv-Fc, scFv dimérique, IgG, etc.) grâce sa plateforme de production d’anticorps recombinants par transfection transitoire en cellules CHO. En savoir +- Production du milligramme à plusieurs grammes
- Compatible « Low endotoxin » (< 10 EU/mg ; voire < 1 EU/mg)
- Système Serum free
- Grade GMP-like
- Contrôles qualité (concentration, pureté, affinités, agrégation, stabilité, etc.).
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